Ksantoproteinovaya lenu to amuaradagba: ami ati agbekalẹ idogba

Ni ibere lati fi idi awọn ti agbara tiwqn ti ọpọlọpọ awọn onjẹ lo ksantoproteinovaya lenu si amuaradagba. Niwaju didun amino acids ni awọn Mix yoo yi ni a rere igbeyewo ayẹwo awọ.

Ohun ti o jẹ amuaradagba

O ti wa ni tun npe ni a amuaradagba, ti o jẹ ile awọn ohun elo fun awọn alãye ara. Awọn ọlọjẹ bojuto isan iwọn, pada sipo awọn farapa ati ki o okú àsopọ ẹya ti awọn orisirisi ara ti, wa ni o irun, ara ati ligament. Pẹlu wọn ikopa, fun ẹjẹ pupa corpuscles, ni išakoso nipasẹ awọn deede isẹ ti ọpọlọpọ awọn homonu ati ma ẹyin.

Eleyi jẹ a eka moleku ti o jẹ a polypeptide nini a ibi-tobi ju 6 ~ 10 ³ daltons. Amuaradagba be lara amino acid awọn iṣẹku ni kan ti o tobi nọmba ti pelu ohun elo ọlọjẹ ara mnu.

Awọn be ti awọn ọlọjẹ

The pato ẹya-ara ti awon oludoti akawe pẹlu kekere molikula àdánù pepitaidi ni wipe ti won ni idagbasoke a onisẹpo mẹta aye be, ni atilẹyin ipa pẹlu orisirisi iwọn ti ifamọra. Awọn ọlọjẹ gbà mẹrin-be. Fun kọọkan ti wọn ni o ni awọn oniwe-ara abuda.

Bi awọn igba ti awọn jc agbari ti awọn ohun ti yo amino acid ọkọọkan, be eyi ti mọ ksantoproteinovaya lenu si amuaradagba. Eleyi be ni a lorekore tun ohun elo ọlọjẹ ara mnu -HN-CH-CO-, a yan apa ti ipilẹṣẹ ni o wa ni ẹgbẹ dè ni amino acids. Wọn ti setumo siwaju ini ti nkan bi kan gbogbo.

Awọn jc amuaradagba be ni ka lagbara to, eyi ni nitori niwaju ti lagbara covalent ibasepo ni ohun elo ọlọjẹ ara ifowopamosi. Awọn Ibiyi ti ọwọ awọn ipele waye ti o da lori awọn eroja ṣeto ninu ni ibẹrẹ ipele.

Awọn Ibiyi ti awọn Atẹle be jẹ ṣee nitori fọn ti awọn amino acid ọkọọkan ni a ajija, ninu eyi ti hydrogen ìde ti wa ni idasilẹ laarin awọn wa.

Iwe giga ipele agbari ti ohun akoso nipa a to ọkan ninu a ajija lori awọn miiran ajẹkù pẹlu awọn iṣẹlẹ ti gbogbo awọn ti ṣee awọn isopọ laarin wọn, pẹlu hydrogen, disulfide, covalent tabi ionic yellow. Awọn esi ni awọn sepo ni awọn fọọmu ti globules.

Awọn aye akanṣe ti awọn onimẹta ẹya pẹlu awọn Ibiyi ti kemikali ìde laarin wọn nyorisi si Ibiyi ti awọn ik fọọmu ti moleku tabi quaternary awọn ipele.

amino acids

Nwọn si fa awọn kemikali-ini ti awọn ọlọjẹ. Nibẹ ni o wa nipa 20 pataki amino acids ṣiṣe awọn soke ni polypeptides ni kan yatọ si ọkọọkan. Yi tun ti wa ni tọka toje aminocarboxylic acid ni awọn fọọmu hydroxyproline ati hydroxylysine ti ari ipilẹ ohun elo ọlọjẹ ara.

Bi awọn kan ami ti ti idanimọ ksantoproteinovaya amuaradagba lenu, niwaju awọn amino acids pese awọn awọ iyipada ti reagents, ni iyanju niwaju pato ẹya ni won tiwqn.

Bi o wa ni jade, ti won ba wa carboxylic acids ti o ti lodo fidipo ti hydrogen atomu lori amino ẹgbẹ.

Ohun apẹẹrẹ be ti awọn moleku le sìn a igbekale agbekalẹ glycine (HNH- HCH- COOH) bi awọn alinisoro amino acid.

Ni idi eyi ọkan ninu awọn hydrogens CH ₂ - le wa ni rọpo nipasẹ a erogba gun yori ninu a benzene oruka, amino, sulfo, carboxy.

Kí ni ksantoproteinovaya lenu

Fun agbara onínọmbà ti awọn ọlọjẹ lilo orisirisi imuposi. Awọn wọnyi ni aati:

• biuret pẹlu awọn hihan aro awọ;
• ninhydrin lati fẹlẹfẹlẹ kan ti bulu-aro ojutu;
• formaldehyde pẹlu awọn idasile ti a pupa awọ;
• Nogier to ìṣokùnfa awọn grẹy-dudu awọ.

Ni rù jade kọọkan ọna safihan niwaju awọn ọlọjẹ ati niwaju awọn iṣẹ-ṣiṣe awọn ẹgbẹ ni won moleku.

Nibẹ ksantoproteinovaya lenu si amuaradagba. O ti wa ni tun npe ni didenukole Mulder. O ntokasi si awọn awọ aati fun awọn ọlọjẹ, ninu eyi ti nibẹ ni o wa didun ati ki o heterocyclic amino acids.

A ẹya-ara ti iru kan sample ilana jẹ nitration acid oyi salayipo amino acid awọn iṣẹku ni pato awọn accession ti awọn nitro ẹgbẹ si benzene oruka.

Awọn esi ti yi ilana ni awọn Ibiyi ti nitro agbo, eyi ti precipitated. Eleyi jẹ ẹya-ara awọn ipilẹ ksantoproteinovaya lenu.

Ohun ti pinnu awọn amino acid

Ko gbogbo aminocarboxylic acid le ṣee wa-ri nipa lilo iru kan ayẹwo. Awọn ifilelẹ ti awọn ẹya-ara ti ksantoproteinovaya amuaradagba erin lenu - niwaju awọn benzene oruka tabi heterocyclic oruka ninu awọn moleku amino acids.

Nitori awọn amuaradagba ti wa ni ya sọtọ lati aminocarboxylic acids meji didun, ninu eyi ti o wa ni a phenyl ẹgbẹ (fun phenylalanine), ati a hydroxyphenyl yori (ni tyrosine).

Pẹlu ksantoproteinovaya lenu ti wa ni ti pinnu heterocyclic amino acid tryptophan, indole nini ohun ti oorun didun arin. Niwaju awọn loke agbo ninu awọn amuaradagba yoo fun awọn ti iwa awọ iyipada ti awọn igbeyewo ayika.

Ohun ti lilo reagents

Fun rù jade awọn lenu ksantoproteinovaya nilo lati mura a 1% ojutu ti ẹyin amuaradagba, tabi Ewebe Oti.

Maa lo ẹyin, eyi ti o ti pín fun siwaju Iyapa ti awọn amuaradagba lati apo. Fun kan 1% ojutu ti amuaradagba ti a ti fomi po ni a tenfold iye ti wẹ omi. Lẹhin ti itu ti awọn Abajade amuaradagba omi yẹ ki o wa filtered nipasẹ orisirisi fẹlẹfẹlẹ ti cheesecloth. Yi ojutu yẹ ki o wa ni fipamọ ni itura ibi.

O jẹ ṣee ṣe lati gbe jade awọn lenu pẹlu kan Ewebe amuaradagba. Lati ṣeto awọn ojutu ti wa ni ti lo alikama iyẹfun ni ohun iye ti 0.04 kg. 0,16 l of wẹ omi. Awọn eroja ti won adalu ni a ìgo eyi ti o ti so fun 24 wakati kan ni itura ibi ni a otutu ti nipa + 1 ° C. Ni opin ti awọn ọjọ ojutu ti a rú, atẹle nipa ase rẹ akọkọ pẹlu owu kìki irun ati ki o - a iwe ti ṣe pọ àlẹmọ. Abajade omi ti a pa kan ni itura ibi. Yi ojutu jẹ o kun bayi ni albumin ida.

Fun rù jade awọn lenu ksantoproteinovaya bi awọn ifilelẹ ti awọn reagent lo oyi acid conc. Siwaju reagents ti wa ni a ojutu ti 10% soda hydroxide tabi amonia, awọn gelatin ojutu ati unconcentrated phenol.

Awọn ogbon ti awọn

Ni kan o mọ tube wa ni ṣe 1% amuaradagba ojutu -th eyin tabi iyẹfun ni ohun iye ti 2 milimita. Lati yi ti wa ni afikun nipa 9 silė ti ogidi oyi acid to flocculation duro. Abajade adalu ti a kikan, Abajade ofeefee ìṣokùnfa maa disappears ati awọn oniwe-awọ lọ sinu ojutu.

Nigba ti o ti omi cools isalẹ ninu awọn tube pẹlú awọn odi kun nipa 9 silė ti soda hydroxide, ogidi, ti o jẹ excess fun awọn ilana. Awọn lenu alabọde di ipilẹ. Akoonu di osan awọ ninu igbeyewo tube.

ẹya ara ẹrọ ti

Niwon ksantoproteinovaya ti a npe ni agbara lenu lati oyi acid nipa awọn iṣẹ ti awọn ọlọjẹ, awọn ayẹwo ni ošišẹ labẹ to wa fume Hood. Kiyesi gbogbo ailewu ona nigbati ṣiṣẹ pẹlu ogidi caustic oludoti.

Awọn Tu ti awọn awọn akoonu lati awọn tube le ṣẹlẹ nigba ti alapapo ilana ti o gbọdọ wa ni kà nigbati ojoro o ni a dimu ati yiyan awọn tẹri.

Titẹ ti ogidi oyi acid ati caustic omi onisuga yẹ ki o nikan lilo a gilasi pipette ati pears roba leewọ pipette nipa ẹnu.

Ojulumo lenu pẹlu phenol

Fun wípé, ilana ati ìmúdájú ti awọn niwaju awọn phenyl awọn ẹgbẹ ti gbe jade pẹlu kan iru awọn ayẹwo hydroxybenzene.

Awọn tube ṣiṣe awọn 2 milimita ti fomi phenol, ki o si maa pẹlú awọn odi, ti a fi kun 2 milimita ti ogidi oyi acid. Ojutu ti a tunmọ si alapapo, nipa eyiti o di ofeefee. Yi lenu jẹ awọn didara ti awọn niwaju awọn benzene oruka.

Ilana hydroxybenzene nitrated pẹlu oyi-acid atẹle nipa Ibiyi ti a adalu p-nitrophenol ati o-nitrophenol ni a ogorun ti 15 lati 35.

Lafiwe igbeyewo pẹlu gelatin

Lati fi mule pe ksantoproteinovaya lenu si amuaradagba han ohun amino acid pẹlu didun be, lo awọn ọlọjẹ ti ko ni a phenolic ẹgbẹ.

Ni kan o mọ tube wa ni ṣe 1% gelatin ojutu ni ohun iye ti 2 milimita. Lati yi ti wa ni afikun nipa 9 silė ti ogidi oyi acid. Abajade adalu jẹ kikan. Ojutu ti a ko awọ ni ofeefee, eyi ti fi han awọn isansa ti amino acids pẹlu ohun ti oorun didun be. Nigba miran nibẹ ni kan diẹ Yellowing ti awọn ayika nitori niwaju ti amuaradagba impurities.

kemikali idogba

Ninu awọn meji igbese lenu gbalaye ksantoproteinovaya awọn ọlọjẹ. Agbekalẹ akọkọ ipele nitration ilana apejuwe amino acid ohun ti lilo ogidi oyi acid.

Ohun apẹẹrẹ ni awọn asomọ ti awọn nitro ẹgbẹ si tyrosine lati dagba nitrotyrosine ati dinitrotirozina. Ni akọkọ nla si benzene oruka ni so ọkan KO ₂ -radical, ati awọn keji yellow ni meji hydrogen awọn ọta wa ni rọpo nipa KO _2. Kemikali agbekalẹ ksantoproteinovaya tyrosine lenu ni ipoduduro nipasẹ lenu pẹlu oyi-acid lati dagba nitrotyrosine moleku.

Nitration ilana ti wa ni de pelu orilede colorless kikun ni ofeefee orin. Ni rù jade yi lenu pẹlu awọn ọlọjẹ ti o ni awọn amino acid awọn iṣẹku phenylalanine tabi tryptophan, ati awọ ti awọn ojutu ayipada.

Igbese keji ni awọn lenu ọja ti nitration ti tyrosine ohun, paapa nitrotyrosine, pẹlu ammonium tabi soda hydroxide. Awọn esi ni a soda tabi ammonium iyọ ninu eyi ti awọn ofeefee-osan awọ. Iru a lenu ti wa ni jẹmọ si awọn seese ti nitrotyrosine ohun ti gbe ninu awọn quinoid fọọmu. Paradà Iyọ ni akoso therefrom nitronic acid, eyi ti o ni a quinone eto ti conjugated ė ifowopamosi.

Bayi dopin ksantoproteinovaya lenu lati awọn ọlọjẹ. Idogba gbekalẹ loke keji igbese.

awọn esi

Nigba ti igbekale ti fifa o wa ninu awọn mẹta Falopiani, awọn itọkasi ojutu ti wa ni ti fomi po pẹlu phenol. Oludoti pẹlu kan benzene oruka fun agbara lenu pẹlu oyi-acid. Bi awọn kan abajade, o ayipada awọ ti awọn ojutu.

Bi ti wa ni mo, gelatin ninu a hydrolyzed fọọmu ti isan. Awọn amuaradagba ko ni awọn didun be ti awọn amino acids. Ko si ayipada ninu awọ ti awọn alabọde nipa lenu pẹlu ohun acid.

Ninu awọn kẹta igbeyewo tube nibẹ ni a rere lenu lati awọn ọlọjẹ ksantoproteinovaya. Ipari le ti wa ni kale bi wọnyi: gbogbo awọn ọlọjẹ pẹlu didun be, boya o je kan phenyl egbe tabi ẹya indole oruka, fi fun awọn ayipada ninu awọ ti awọn ojutu. Eleyi jẹ nitori awọn Ibiyi ti nitro agbo pẹlu kan ofeefee awọ.

Rù jade kan awọ lenu ododo niwaju ti awọn orisirisi kemikali ẹya ni amino acids ati awọn ọlọjẹ. Apere gelatin fihan wipe awọn oniwe-tiwqn pẹlu aminocarboxylic acid ko nini a phenyl egbe tabi a salayipo be.

Pẹlu ksantoproteinovaya lenu le ti wa ni salaye nipa Yellowing ti awọn awọ ara nigba ti loo si o kan to lagbara oyi acid. Kanna awọ yoo di frothy wara nigba rẹ iru onínọmbà.

Ni isẹgun yàrá asa yi awọ ayẹwo ti wa ni ko lo fun erin ti amuaradagba ninu ito. Eleyi jẹ nitori awọn awọ ofeefee ti awọn ito ara.

Ksantoproteinovaya lenu di increasingly lo fun quantification ti amino acids bi tryptophan ati tyrosine, gẹgẹ bi ara ti awọn orisirisi awọn ọlọjẹ.