Molikula ti ibi iwadi ọna ati won lilo

Molikula ti ibi iwadi ọna mu ohun pataki ipa ni igbalode oogun, oniwadi aisan, ati isedale. O ṣeun si mura lati ni awọn iwadi ti DNA ati RNA, awọn eniyan ni anfani lati Ṣawari awọn eniyan ti awọn oni-mọ awọn causative oluranlowo, lati da awọn ti o fẹ nucleic acid ni a adalu ti acids, ati bẹbẹ lọ

Molikula-ibi ọna. Ki ni o?

Pada ninu awọn 70-80s ti awọn sayensi wà ni akọkọ lati decipher awọn eniyan ara eniyan. Yi iṣẹlẹ fun iwuri si awọn idagbasoke ti jiini ti ina- ati molikula isedale. Iwadi ti-ini ti DNA ati RNA ti túmọ pe o jẹ bayi ṣee ṣe lati lo awọn nucleic acids fun awọn idi ti arun okunfa, iwadi pupọ.

Igbaradi ti DNA ati RNA

Molikula ti ibi aisan ọna beere ti o bere ohun elo ti: igba yi nucleic acid. Nibẹ ni o wa orisirisi ona lati yan awon oludoti lati awọn ẹyin ti ngbe oganisimu. Kọọkan ni o ni awọn oniwe-anfani ati alailanfani, ati awọn ti o yẹ ki o wa ni kà nigbati yan kan ọna ti isolating nucleic acids ni funfun fọọmu.

1. Igbaradi ti DNA nipa Marmur. Awọn ọna oriširiši ni atọju awọn adalu ti oti oludoti, precipitates Abajade funfun DNA. Awọn downside ti yi ọna ti o jẹ awọn lilo ti ko daa oludoti, phenol ati chloroform.

2. Ipinya ti DNA lori ariwo. Awọn ifilelẹ ti awọn nkan ti o ti lo nibi - ni guanidine thiocyanate (GuSCN). O nse ni iwadi oro ti deoxyribonucleic acid lori specialized sobsitireti, lati eyi ti o le ti wa ni ti paradà gbà nipa ọna ti pataki kan saarin. Sibẹsibẹ GuSCN - jẹ ẹya onidalẹkun ti awọn TCP, ati paapa kan kekere ìka ti ti o olubwon nile ni DNA le ni agba awọn dajudaju ti awọn lati damọ pq lenu, ti o jẹ pataki nigbati ṣiṣẹ pẹlu nucleic acids.

3. Ojoriro ti impurities. Awọn ọna ti yato si lati išaaju eyi ni wipe awọn ohun ti ara wọn ko ba wa ni nile dehoksiribonukleinovoy acid ati impurities. Lati ṣe eyi, lo dẹlẹ exchangers. Awọn daradara ni wipe ko gbogbo oludoti le yanju.

4. Ibi waworan. Yi ọna ti o ti lo ni igba nigba ti o ko ba nilo lati ni deede alaye nipa awọn be ti DNA moleku, ati awọn nilo lati gba diẹ ninu awọn statistiki. Idi ni wipe awọn nucleic acid be le ti wa ni ti bajẹ nigba ti mimu abufọ, paapa alkalies.

Sọri ti iwadi ọna

Gbogbo molikula-ibi ọna ti iwadi wa ni pin si meta pataki awọn ẹgbẹ:

1. alaye (nipa lilo a ọpọ ti ensaemusi). Eyi pẹlu PCR - lati damọ pq lenu, eyi ti yoo kan pataki ipa ni ọpọlọpọ awọn ti awọn aisan ọna.

2. Neamplifikatsionnye. Yi egbe ti awọn ọna ti wa ni nkan taara pẹlu awọn iṣẹ ti nucleic acid apapo. Apeere wa ni 3 iru blots, ni nibe ti arabara, ati be be

3. ọna da lori awọn ti idanimọ ti awọn ifihan agbara lati ibere moleku, eyi ti sopọ si kan pato DNA tabi RNA ibere. Apẹẹrẹ - ti arabara eto Hybride Yaworan System ojutu (hc2).

Ensaemusi ti o le ṣee lo ni molikula ti ibi iwadi awọn ọna

Ọpọlọpọ awọn molikula aisan ni imuposi mudani ninu lilo fun ọrọ ibiti o ti ensaemusi. Ni isalẹ wa ni lilo julọ igba:

1. hihamọ henensiamu - "ge" awọn DNA moleku si awọn pataki awọn ẹya ara.

2. DNA lati damọ - synthesizes kan ni ilopo-idaamu deoxyribonucleic acid moleku.

3. yiyipada transcriptase (ẹnjinia transcriptase) - lo lati synthesize DNA lati ẹya RNA awoṣe.

4. DNA ligase - jẹ lodidi fun awọn Ibiyi ti phosphodiester ìde laarin nucleotides.

5. exonuclease - yọ nucleotides lati opin ipin ti awọn deoxyribonucleic acid moleku.

PCR - awọn ipilẹ ọna ti DNA alaye

Lati damọ pq lenu (PCR) ti wa ni o gbajumo ni lilo ni igbalode molikula isedale. Yi ọna, ninu eyi ti a nikan DNA moleku le ti wa ni gba kan nla nọmba ti awọn adakọ (amplifying moleku).

Awọn ifilelẹ ti awọn iṣẹ ti PCR:

- okunfa ti arun;

- ti ẹda oniye DNA àáyá, Gene.

Lati gbe jade ni lati damọ pq lenu nbeere awọn wọnyi eroja: ni ibẹrẹ DNA moleku, a thermostable DNA lati damọ (Taq tabi Pfu), deoxyribonucleotide phosphates (orisun ti nitrogen ìtẹlẹ), awọn awọn ẹrọ ibugbamu (2 alakoko 1 DNA moleku) ati ara a saarin eto eyi ti o le se gbogbo awọn aati.

PCR oriširiši meta igbesẹ: denaturation, alakoko ki o tutu ati ki o elongation.

1. denaturation. Ni a iwọn otutu ti 94-95 iwọn Celsius proshodit ya awọn hydrogen ìde laarin awọn ẹwọn meji ti DNA, ati bi a abajade ti a gba meji nikan-idaamu ohun ti.

2. annealed awọn ẹrọ ibugbamu. Ni a iwọn otutu ti 50-60 iwọn centigrade waye accession awọn ẹrọ ibugbamu ni opin ti nikan-idaamu nucleic acid ohun ti ni ibamu si awọn iru ti complementarity.

3. elongation. Ni a iwọn otutu ti 72 iwọn ti wa ni sise ọmọbinrin ė idaamu deoxyribonucleic acid ohun ti.

DNA itẹlera

Molikula ti ibi iwadi ọna igba beere imo ti ọkọọkan awọn nucleotides ni a moleku ti deoxyribonucleic acid. Lati mọ awọn jiini koodu sequenced. Molikula àyẹwò ti awọn iwaju yoo wa ni da lori awọn ìmọ ni ibe ni awọn ipinnu ti awọn eniyan ọkọọkan.

Awọn wọnyi orisi ti itẹlera:

• itẹlera nipasẹ awọn Maxam-Gilbert;
• Sanger itẹlera;
• pyrosequencing;
• nanoporovoe itẹlera.